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    DNA polymerase I

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    DNA 聚合酶 I 是具有 5′→3′ 和 3′→5′ 脫氧核糖核酸外切酶活性的 DNA 聚合酶。 DNA 聚合酶 I 可摻入生物素化的核苷酸。

    應用: 
    依賴于 DNase I 的切口平移 (1,2)。 cDNA 克隆中的第二鏈合成 (3)。 填補 5′ 突出端 (4)。

    來源: 
    純化自表達質粒所帶 DNA 聚合酶 I 基因的大腸桿菌。

    性能和質量測試: 
    脫氧核糖核酸內切酶分析;確定依賴于 DNase I 的切口平移的效率。

    單位定義: 
    一個單位的酶量可以在 37°C 的反應體系中,使用模板引物在 30 分鐘內向酸沉淀材料摻入 10 nmol 總脫氧核糖核苷酸。

    單位反應條件: 
    反應物共 100 μl,包括 50 mM 磷酸鉀 (pH 7.0)、6.7 mM MgCl2、1 mM 2-巰基乙醇、80 μg/ml 模板引物、32 μM dTTP、69 nM [3H]dTTP 和酶,溫度為 37°C,時間 30 分鐘。

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