HiClone™ 重組克隆體系應用 E.coli 和 λ 噬菌體特異位點的重組酶促體系使 DNA 片段在載體間相互轉換;其原理與 Gateway® 克隆技術相同。HiClone™ 重組克隆體系主要包含以下產品:
1. HiClone™ Mixes:催化 attL x attR 和 attB x attP 重組反應。
2. pGTK™ 表達載體: 主要用于構建即用型表達克隆。
HiClone™ 重組克隆體系與 Gateway® BP/LR克隆技術完全兼容。
產品優勢
• 由重組酶、表達載體和已驗證ORF序列的穿梭克隆組成的一個完整的重組克隆體系;
• HiClone™ LR Mix 和 HiClone™ BP Mix 的活性高;
• 提供帶有不同篩選標記和標簽的 pEZ™ 表達載體,這些載體可用于基因克隆、基因編輯、蛋白質純化和基因功能分析;
• 可以完全直接替代Gateway BP系統。
產品應用
• 構建即用型表達克。使穿梭克隆或其它 DNA 片段插入到表達載體。
• 蛋白質純化:使目的基因在一個或多個系統中表達,然后用于蛋白質純化、形成結晶、抗體的制備、DNA 結合化驗等。
• 啟動子交換:克隆目的基因到帶有不同啟動子的載體。
• 啟動子分析:利用報告基因測試不同啟動子的功能,例如:熒光素酶。
• 基因標簽:表達不帶標簽或帶有不同融合標簽的目的基因,例如: 6XHis、Flag®、GFP 等;可用于免疫共沉淀或亞細胞 定位等。
HiClone™ 重組克隆體系原理
HiClone™ 重組克隆體系應用 E.coli 和 λ 噬菌體特異位點的重組酶促體系使 DNA 片段在載體間相互轉換;其原理與 Gateway® 克隆技術相同(圖1)。 |
|  圖 1. E.coli 和 λ 噬菌體位點間的重組機制。
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