TA Cloning試劑盒（含 pGTK-T2 載體）提供了一種快速的一步法克隆策略，可將經 Taq 擴增的 PCR 產物直接插入質粒載體中。TA Cloning試劑盒使用 pGTK-T2克隆載體和 T4 DNA 連接酶，在 15 分鐘的室溫連接步驟中生成連接產物。反應通常產生 > 90% 包含插入片段的重組體。
TA Cloning試劑盒的特點：
•快速便捷—15 分鐘、室溫連接
•高效—藍白斑篩選和 > 80% 含正確插入片段的克隆
•靈活—選擇卡那霉素或氨芐青霉素抗性，實現靈活的抗生素選擇
•輕松—無需對 PCR 產物進行任何酶修飾
•簡化—不需要使用包含限制性位點的 PCR 引物
pGTK-T2載體提供：
•3'-T 突出端，用于直接連接 Taq 擴增的 PCR 產物
•T7 啟動子，用于體外 RNA 轉錄和測序
•兩側具有 EcoR I 位點的通用性多位點接頭，可方便地切除插入片段
•M13 正向和反向引物位點，用于測序
TA 克隆的工作原理
Taq 聚合酶具有非模板依賴性活性，可在 PCR 產物的 3' 端引入單脫氧腺苷 (A)。該試劑盒中提供的線性化載體具有單個 3' 脫氧胸腺嘧啶核苷 (T) 殘基。這使得 PCR 插入片段高效地與載體連接。
