TaqPlus Fast Advanced Cells-to-CT 試劑盒是一個培養細胞進行基因表達分析,而無需 RNA 純化步驟。TaqPlus Fast Advanced Cells-to-CT 細胞裂解試劑提供了極高靈敏度的 Fast Advanced 逆轉錄酶混合物、2x RT 緩沖液和一流的 TaqPlus Fast Advanced 預混液。
•全面—優化的工作流程包括移除 gDNA 的細胞裂解試劑、新型 Fast Advanced RT 酶混合物、緩沖液和新型 TaqPlus Fast Advanced Master Mix
•快速—7分鐘樣品制備,包括在室溫下進行 DNase處理
•簡便—可以在試管或直接在培養板中裂解樣品
•穩健—10–可以對每個樣品100,000個細胞進行基因表達分析;結果與從純化 RNA 中獲得的相同
•高效—含有足夠的試劑500以100從起始樣品中生成實時熒光定量 PCR 結果
無需從培養細胞中分離 RNA 的獨特方法
Cells-to-Ct 方法具有獨特的裂解試劑,可裂解細胞并保護 RNA。5在分鐘裂解步驟中同時去除 DNA,可節省時間并提高易用性。然后通過加入“終止液停止裂解”,該終止液會不可逆地與裂解試劑結合。
TaqPlus Fast Advanced Cells-to-CT 試劑盒含有用于 cDNA 合成的逆轉錄 (RT) 試劑和用于實時熒光定量 PCR 分析的 TaqPlus Fast Advanced預混液。TaqPlus 引物/探針對單獨出售。
簡單7-分鐘的樣品制備
TaqPlus Fast Advanced Cells-to-CT 試劑盒專門設計用于10–100,000個培養細胞/樣品。細胞先用 PBS 清洗,再于室溫下置于裂解液中裂解5分鐘;同時進行 DNase 處理。裂解過程在加入終止液,室溫孵育 2 分鐘后終止。裂解液現可直接進行逆轉錄或在–20° C條件下短期儲存,或在-80°C條件下長期儲存。
較高的檢測靈敏度
不同于某些將 RT 反應中裂解物的量限制在10%的競品試劑盒,TaqPlus Fast Advanced Cells-to-CT 試劑盒可以兼容總 RT 反應體積45%的細胞溶解產物。此外,cDNA 最高可占實時熒光定量 PCR 反應體積的45%。在優化的 RT 反應中加入大量裂解物,以及后續使用 TaqPlus Fast Advanced預混液 進行實時熒光定量 PCR 反應的大量 cDNA ,可較大限度提高靈敏度。該預混液可精確而準確地對靶標進行擴增,從而能夠檢測少量靶標,如低表達水平的轉錄物。
減少樣品損失和轉移錯誤
由于可直接在培養孔(96或384孔)中處理樣品,故樣品處理和樣品損失或轉移錯誤的可能性被降至較低,從而有益于快速、高通量的處理。與傳統的多步驟 RNA 分離方案不同,無需加熱、清洗或離心。該試劑盒大大簡化了耗時費力的30–60分鐘流程,將其縮短至7分鐘。
與金標準 TaqPlus 基因表達檢測兼容
TaqPlus Fast Advanced Cells-to-CT 試劑盒工作流程可實現對任何>700,000的 TaqPlus 基因表達檢測進行非常卓越的基因表達評估。通過 TaqPlus 基因表達檢測的 一系列選擇,此試劑盒進行了廣泛的靈敏度測試。
經過驗證的卓越性能
TaqPlus Fast Advanced Cells-to-CT 試劑盒的所有組分均經過優化,具有一致性且可靠的性能。